La Catedral de Sevilla es un templo de culto permanente. Abre sus puertas al culto cada mañana a las 8:00 para las distintas Misas que se suceden a primera hora; Capilla Real a las 8:30 h, Capilla de la Antigua de lunes a viernes a las 9:00 h y Oficio Divino y Misa Coral a las 9:30 h.
La Capilla Real permanece abierta al culto por el acceso de Puerta de Campanillas hasta las 13:30 h y vuelve a abrir de 17:00 h a 19:00 h para la oración y las misas entre semana, a las 12:00 h. y 18:00 h. viéndose ampliado este horario los sábados, de 17:00 a 21:00 horas para las celebraciones dominicales y sabatina en honor a la Virgen de los Reyes, y fiestas de precepto, además de la celebración de Bodas y Bautizos.
De lunes a sábado de 11:00 h. a 13:00 h. también en la Capilla Real, hay capellanes de culto para confesar.
Existe la posibilidad de recibir el Sacramento del Perdón , que se ofrece diariamente por los capellanes de culto, a las 17:00 h, en las dependencias del Cabildo situadas junto al acceso a la Capilla Real por la Puerta de Campanillas. Además, el capitular Penitenciario ofrece la confesión cada día en las primeras horas de culto, desde las 9:00 h. hasta las 10:30 h. en el confesionario situado junto a la Capilla de Ntra. Señora de la Antigua.
Con la apertura de la Parroquia del Sagrario, desde el pasado mes de diciembre, las posibilidades de encontrar un espacio de oración y de confesión se incrementan con los horarios de apertura del templo parroquial de11:00 h a 14:00 h y de 18:00 h a 21:00 h.